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豚鼠ELISA試劑盒

簡要描述：

豚(tun)鼠ELISA試劑盒標(biao)(biao)本(ben)要求(qiu) 1．標(biao)(biao)本(ben)采(cai)集后盡早進行提(ti)取(qu)(qu)，提(ti)取(qu)(qu)按相關文獻進行，提(ti)取(qu)(qu)后應(ying)盡快進行實驗。若(ruo)不能馬上進行試驗，可將(jiang)標(biao)(biao)本(ben)放(fang)于-20℃保存，但應(ying)避免反復凍融2．不能檢測含NaN3的樣(yang)品(pin)，因NaN3抑制辣(la)根過氧化物(wu)酶(mei)的（HRP）活(huo)性。

更新時間(jian)：2017-12-09

豚鼠ELISA試劑盒

試劑盒組(zu)成

 

1

20倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液(ye)

3ml×1瓶

2

酶標試劑

3ml×1瓶

8

標準品（960μg/L）

0.5ml×1瓶

3

酶標包被板

12孔×4條

9

標準品(pin)稀釋液(ye)

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋(shi)液

3ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

3ml×1瓶

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B液

3ml×1/瓶

12

密封袋(dai)

1個

 

豚鼠ELISA試劑盒標本要求 

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放(fang)于(yu)-20℃保存，但應避免反(fan)復凍融

2．不能(neng)檢測含NaN3的樣(yang)品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 標準品的稀(xi)釋：本(ben)試劑盒提供原倍標準品一(yi)支，用戶可按(an)照下列圖表在小試管中(zhong)進(jin)行稀(xi)釋。

 

480μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

240μg/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

120μg/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

60μg/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

30μg/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

2. 加(jia)樣：分別設(she)空白(bai)孔（空白(bai)對(dui)照孔不加(jia)樣品及酶標(biao)(biao)試劑，其(qi)余(yu)各步操作相同）、標(biao)(biao)準孔、待測樣品(pin)孔(kong)。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加(jia)樣將樣品加(jia)于酶(mei)標板孔底(di)部，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動混(hun)勻。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌(di)：小心揭掉封板膜，棄(qi)去(qu)液體(ti)，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光(guang)顯色(se)15分鐘.

10. 終止：每孔加終止液50μl，終止反應（此時藍(lan)色立轉(zhuan)黃(huang)色）。

11. 測定：以空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加(jia)終止

計算

 以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋(shi)倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍(bei)數(shu)，即為(wei)樣品的實際(ji)濃度。 

 注意事項:

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可(ke)能會有結晶析出(chu)，稀釋時(shi)可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影(ying)響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍數(shu)（×n×5）。

5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉(cha)污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

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