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倉鼠基質金屬蛋白酶9（MMP-9） ELISA試劑盒

簡要描述：

倉鼠基質金屬蛋白酶9(MMP-9) ELISA試劑盒
使用目的：
為定量(性)測定活化的目標濃度的血清，血漿，組織勻漿，細胞培養上清及其他生物液體。研究使用不是用于診斷或治療程序。
如(ru)果你有(you)任何問題，請上(shang)海義森生(sheng)物科技有(you)限(xian)公司(si)。

更新(xin)時(shi)間：2016-01-18

倉鼠明膠酶B（Gelatinase B）ELISA試劑盒

試劑盒組成

1

20倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

3ml×1瓶

2

酶標試劑(ji)

3ml×1瓶

8

標準品（960μg/L）

0.5ml×1瓶

3

酶(mei)標(biao)包被板

12孔×4條

9

標準品稀釋液(ye)

1.5ml×1瓶

4

樣品稀釋液

3ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

3ml×1瓶

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B液

3ml×1/瓶

12

密(mi)封(feng)袋

1個

標本要求 

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標(biao)本放(fang)于-20℃保存，但(dan)應避免(mian)反(fan)復(fu)凍融(rong)

2．不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作步驟

1. 標(biao)準品(pin)的稀(xi)釋：本試劑(ji)盒(he)提(ti)供原倍標(biao)準品(pin)一支，用戶可按照(zhao)下列圖表在小試管中進行稀(xi)釋。

480μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

240μg/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

120μg/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

60μg/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

30μg/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加樣：分別設空(kong)白(bai)(bai)孔（空(kong)白(bai)(bai)對照(zhao)孔不加樣品及酶標(biao)試劑，其余各步操(cao)作相同(tong)）、標(biao)準孔、待(dai)測樣品孔(kong)。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣將樣品加于酶標板孔底部(bu)，盡量不觸及孔壁，輕輕晃動(dong)混勻(yun)。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育(yu)30分鐘。   

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封(feng)板膜，棄(qi)去液體(ti)，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避(bi)光顯色15分鐘.

10. 終(zhong)(zhong)止：每(mei)孔加終(zhong)(zhong)止液50μl，終止反應（此時藍色(se)立(li)轉黃色(se)）。

11. 測定(ding)：以(yi)空(kong)白空(kong)調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在(zai)加(jia)終止

倉鼠基質金屬蛋白酶9（MMP-9） ELISA試劑盒

計算

 以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實(shi)際濃(nong)度。 

 注意事項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時(shi)可在水浴中加(jia)溫(wen)助溶，洗(xi)滌時不影(ying)響(xiang)結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總稀釋倍(bei)數(shu)（×n×5）。

5． 封板膜只限(xian)一次性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保存條件及有效期

1．試劑(ji)盒保存(cun)：；2-8℃。

2．有效期：6個月

 

 

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