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豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒

簡要描述:

豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒
使用目的:
為定量(性)測定活化的目標濃度的血清,血漿,組織勻漿,細胞培養上清及其他生物液體。研究使用不是用于診斷或治療程序。
如果你有任何問題,請上海義森生(sheng)物(wu)科技有限公司。

更新時間:2016-01-18

豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒

試劑盒組成

1

20倍濃縮洗滌液

20ml×1

7

終止(zhi)液

3ml×1

2

酶標(biao)試劑

3ml×1

8

標準品(960μg/L

0.5ml×1

3

酶(mei)標包被

12孔×4

9

標準品(pin)稀釋液

1.5ml×1

4

樣品稀釋(shi)液

3ml×1

10

說明書

1

5

顯色劑A

3ml×1

11

封(feng)板膜

2張  

6

顯色劑B

3ml×1/

12

密封袋

1

標本要求 

1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標(biao)本放于-20℃保存,但(dan)避免反(fan)復(fu)凍融

2.不(bu)能(neng)檢測含(han)NaN3的樣品,因NaN3抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。

操作步驟(zou)

1. 標(biao)準(zhun)品(pin)的稀釋:本(ben)試(shi)(shi)劑盒(he)提供原倍標(biao)準(zhun)品(pin)一支(zhi),用戶可按(an)照下列(lie)圖表在小試(shi)(shi)管中(zhong)進行稀釋。

480μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

240μg/L

4號標準品

150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

120μg/L

3號標準品

150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

60μg/L

2號標準品

150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

30μg/L

1號標準品

150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加(jia)樣:分(fen)別設空(kong)白孔(kong)(空(kong)白對照孔(kong)不加(jia)樣品及(ji)酶標(biao)試劑,其余各(ge)步操作相(xiang)同(tong))、標(biao)準孔(kong)、待(dai)測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加(jia)樣將樣品加(jia)于酶標(biao)板孔底部(bu),盡(jin)量不觸及(ji)孔壁(bi),輕(qing)輕(qing)晃動混勻

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫(wen)育30分鐘(zhong)。   

4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌:小(xiao)心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 

7. 溫育:操作同3

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避(bi)光顯色15分鐘(zhong).

10. 終止:每孔加終止50μl,終止反應(此時藍色立(li)轉黃色)

11. 測定:以空(kong)白空(kong)調零(ling),450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 測(ce)定應在加終(zhong)止

豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)ELISA試劑盒

計算

 以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋(shi)倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀(xi)釋倍數,即為(wei)樣品的實際(ji)濃度。 

 注(zhu)意事項(xiang)

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2濃洗滌液可能會(hui)有結晶析出,稀釋時可在水浴中加(jia)溫助溶,洗滌時不影響(xiang)結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以(yi)總稀釋倍數(×n×5)。

5. 封板膜只限(xian)一次性使用,以避(bi)免交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

保存條件及(ji)有效(xiao)期

1試(shi)劑盒保存:2-8

2.有效期:6個月

 

 

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