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倉鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）ELISA試劑盒

簡要描述：

倉鼠核因子κB受體活化因子配基(RANKL)ELISA試劑盒
使用目的：
為定量(性)測定活化的目標濃度的血清，血漿，組織勻漿，細胞培養上清及其他生物液體。研究使用不是用于診斷或治療程序。
如(ru)果你有任何問題，請上海(hai)義森生(sheng)物科(ke)技(ji)有限公司。

更新時間(jian)：2016-01-18

倉鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）ELISA試劑盒

試(shi)劑盒組成

1

20倍濃縮洗滌液

20ml×1瓶

7

終止液

3ml×1瓶

2

酶(mei)標試劑(ji)

3ml×1瓶

8

標準品（960μg/L）

0.5ml×1瓶

3

酶標包被板

12孔×4條

9

標準(zhun)品稀釋液

1.5ml×1瓶

4

樣品(pin)稀釋液

3ml×1瓶

10

說明書

1份

5

顯色劑A液

3ml×1瓶

11

封板膜

2張  

6

顯色劑B液

3ml×1/瓶

12

密封袋

1個

標本(ben)要求 

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將標本放于(yu)-20℃保(bao)存，但(dan)應避免反復凍融

2．不能檢測含NaN3的樣(yang)品(pin)，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

操作(zuo)步驟

1. 標(biao)準品的稀釋(shi)：本試劑盒提供原倍標(biao)準品一(yi)支，用戶可按照下(xia)列圖表(biao)在小試管中進行(xing)稀釋(shi)。

480μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

240μg/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

120μg/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

60μg/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

30μg/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

2. 加(jia)樣(yang)：分別(bie)設空(kong)(kong)白孔（空(kong)(kong)白對照孔不(bu)加(jia)樣(yang)品及酶(mei)標試劑，其余各步(bu)操作相同(tong)）、標準孔、待(dai)測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣(yang)將(jiang)樣(yang)品加于(yu)酶標(biao)板(ban)孔(kong)(kong)底部，盡量(liang)不觸及(ji)孔(kong)(kong)壁，輕輕晃(huang)動混勻(yun)。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。   

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗(xi)滌：小心揭掉封板(ban)膜，棄去液體(ti)，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避光(guang)顯色(se)15分鐘.

10. 終(zhong)止：每孔加終(zhong)止液50μl，終止反應（此時藍色(se)立轉黃色(se)）。

11. 測定：以(yi)空白空調零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測(ce)定應(ying)在加終止

倉鼠核因子κB受體活化因子配基（RANKL）ELISA試劑盒

計算

 以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀(xi)釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋(shi)倍(bei)數，即(ji)為樣品的實際濃(nong)度。 

 注意(yi)事項(xiang)

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃(nong)洗滌液可(ke)能會有(you)結晶(jing)析出(chu)，稀釋時(shi)可(ke)在水浴(yu)中加溫助溶，洗滌時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘(cheng)以總稀(xi)釋倍數（×n×5）。

5． 封板膜只限(xian)一次(ci)性使用，以避免交叉污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

保存條件及(ji)有效期

1．試劑(ji)盒(he)保存：；2-8℃。

2．有效期：6個月

 

 

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