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人Elisa試劑盒

簡要描述：

人(ren)Elisa試劑(ji)盒計算 以(yi)標(biao)準(zhun)(zhun)物(wu)的(de)濃(nong)(nong)度(du)為橫坐(zuo)標(biao)，OD值為縱坐(zuo)標(biao)，在坐(zuo)標(biao)紙上繪(hui)出標(biao)準(zhun)(zhun)曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)，根據(ju)樣(yang)(yang)品的(de)OD值由標(biao)準(zhun)(zhun)曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)查出相應的(de)濃(nong)(nong)度(du)；再乘以(yi)稀釋倍(bei)數；或用標(biao)準(zhun)(zhun)物(wu)的(de)濃(nong)(nong)度(du)與OD值計算出標(biao)準(zhun)(zhun)曲(qu)(qu)線(xian)(xian)(xian)的(de)直線(xian)(xian)(xian)回歸方(fang)程式，將樣(yang)(yang)品的(de)OD值代入方(fang)程式，計算出樣(yang)(yang)品濃(nong)(nong)度(du)，再乘以(yi)稀釋倍(bei)數，即為樣(yang)(yang)品的(de)實際濃(nong)(nong)度(du)。

更新時(shi)間：2016-07-28

人Elisa試劑盒標本(ben)要求 

1．標本采集后盡早進行提取，提取按相關文獻進行，提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗，可將(jiang)標本放于-20℃保存，但應避免反復凍融(rong)

2．不能檢測含NaN3的(de)樣(yang)品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。

人Elisa試劑盒操作(zuo)步驟(zou)

1. 標準(zhun)品的(de)稀釋：本試劑盒提供原倍(bei)標準(zhun)品一支，用戶可按照(zhao)下列圖(tu)表在小試管中進(jin)行稀釋。

 

480μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

240μg/L

4號標準品

150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液

120μg/L

3號標準品

150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液

60μg/L

2號標準品

150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液

30μg/L

1號標準品

150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

2. 加樣：分別(bie)設空(kong)白(bai)孔（空(kong)白(bai)對(dui)照孔不(bu)加樣品及(ji)酶標試劑，其余各步操作(zuo)相同）、標準孔、待測樣品(pin)孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl，待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl，然后再加待測樣品10μl（樣品zui終稀釋度為5倍）。加樣(yang)將樣(yang)品加于酶標板孔底部(bu)，盡量不觸(chu)及孔壁，輕輕晃動混(hun)勻(yun)。

3. 溫育：用封板膜封板后置37℃溫育(yu)30分鐘。   

4. 配液：將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌：小心揭掉封板膜，棄去液體，甩干，每孔加滿洗滌液，靜置30秒后棄去，如此重復5次，拍干。

6. 加酶：每孔加入酶標試劑50μl，空白孔除外。 

7. 溫育：操作同3。

8. 洗滌：操作同5。

9. 顯色：每孔先加入顯色劑A50μl，再加入顯色劑B50μl，輕輕震蕩混勻，37℃避(bi)光顯色15分鐘.

10. 終(zhong)止：每(mei)孔加終(zhong)止液50μl，終止反應（此(ci)時藍色(se)立轉(zhuan)黃色(se)）。

11. 測(ce)定：以空白空調(diao)零，450nm波長依序測量各孔的吸光度（OD值）。 測定應在加終止

計算

 以標準物的濃度為橫坐標，OD值為縱坐標，在坐標紙上繪出標準曲線，根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度；再乘以稀釋倍數；或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式，將樣品的OD值代入方程式，計算出樣品濃度，再乘以稀釋倍數，即為樣品的實際濃度。 

 注意事項

1．試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。

2．濃洗滌(di)液(ye)可能(neng)會有結(jie)晶析出(chu)，稀釋時(shi)可在水浴中加溫助溶，洗滌(di)時不影響結果。

3．各步加樣均應使用加樣器，并經常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內，如標本數量多，推薦使用排槍加樣。

4． 請每次測定的同時做標準曲線，做復孔。如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以總(zong)稀釋倍數（×n×5）。

5． 封(feng)板(ban)膜(mo)只(zhi)限一次性使(shi)用(yong)，以避免交(jiao)叉(cha)污染。

6．底物請避光保存。

7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9．本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準。

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