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大鼠Elisa試劑盒

簡要描述:

大(da)鼠Elisa試劑盒標本要(yao)求 1.標本采集后盡早(zao)進(jin)(jin)行提取,提取按(an)相關(guan)文(wen)獻(xian)進(jin)(jin)行,提取后應盡快進(jin)(jin)行實(shi)驗(yan)。若不能馬上進(jin)(jin)行試驗(yan),可將標本放于-20℃保存,但應避免(mian)反復凍融(rong)2.不能檢測含(han)NaN3的(de)樣品,因NaN3抑制辣(la)根(gen)過氧化(hua)物酶的(de)(HRP)活性。

更新時間:2016-07-28

大鼠Elisa試劑盒操(cao)作步驟

1. 標準品的稀釋:本試劑盒提(ti)供原倍標準品一支,用戶(hu)可按照下列(lie)圖(tu)表在(zai)小試管中進行(xing)稀釋。

 

480μg/L

5號標準品

150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液

240μg/L

4號標準品

150μl5號標準品加入150μl標準品稀釋液

120μg/L

3號標準品

150μl4號標準品加入150μl標準品稀釋液

60μg/L

2號標準品

150μl3號標準品加入150μl標準品稀釋液

30μg/L

1號標準品

150μl2號標準品加入150μl標準品稀釋液

 

2. 加樣:分(fen)別設空白(bai)孔(kong)(kong)(空白(bai)對照孔(kong)(kong)不加樣品及(ji)酶標試劑,其余各(ge)步操作(zuo)相同(tong))、標準孔(kong)(kong)、待測樣(yang)品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品zui終稀釋度為5倍)。加樣將(jiang)樣品加于酶標(biao)板孔底部(bu),盡量不觸(chu)及孔壁,輕輕晃(huang)動混勻(yun)

3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分(fen)鐘。   

4. 配液:將20倍濃縮洗滌液用蒸餾水20倍稀釋后備用

5. 洗滌:小心揭掉(diao)封板膜,棄(qi)去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30秒后棄去,如此重復5次,拍干。

6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。 

7. 溫育:操作同3

8. 洗滌:操作同5

9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘(zhong).

10. 終(zhong)止:每孔加(jia)終(zhong)止50μl,終止反應(此時藍色(se)立轉(zhuan)黃色(se))

11. 測(ce)定:以空(kong)白空(kong)調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值) 測定應(ying)在加(jia)終止

大鼠Elisa試劑盒計算(suan)

 以標準物的濃度為橫坐標,OD值為縱坐標,在坐標紙上繪出標準曲線,根據樣品的OD值由標準曲線查出相應的濃度;再乘以稀釋倍數;或用標準物的濃度與OD值計算出標準曲線的直線回歸方程式,將樣品的OD值代入方程式,計算出樣品濃度,再乘以稀釋倍數,即為樣(yang)品(pin)的實際濃(nong)度。 

 注意(yi)事項

1.試劑盒從冷藏環境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用,酶標包被板開封后如未用完,板條應裝入密封袋中保存。

2濃洗滌液(ye)可能會有結晶析(xi)出,稀釋時可在水浴中加(jia)溫助溶,洗滌(di)時(shi)不影響結果。

3.各步加樣均應使用加樣器,并經常校對其準確性,以避免試驗誤差。一次加樣時間控制在5分鐘內,如標本數量多,推薦使用排槍加樣。

4. 請每次測定的同時做標準曲線,做復孔。如標本中待測物質含量過高(樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值),請先用樣品稀釋液稀釋一定倍數(n倍)后再測定,計算時請zui后乘以(yi)總稀釋倍(bei)數(×n×5)。

5. 封板膜只(zhi)限(xian)一(yi)次性使用(yong),以避免(mian)交叉污染。

6.底物請避光保存。

7.嚴格按照說明書的操作進行,試驗結果判定必須以酶標儀讀數為準.

8.所有樣品,洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。

9.本試劑不同批號組分不得混用。

10. 如與英文說明書有異,以英文說明書為準。

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